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2024-07-18 - 来源：中科检测
随着年龄的增长，皮肤逐渐失去弹性和紧致度，这主要归因于皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白的减少。化妆品行业一直致力于开发能够增强皮肤紧致度的产品。为了科学评估这些产品的效果，体外测试方法如人源成纤维细胞增殖试验被广泛采用。本文将详细介绍这一测试的原理、步骤及结果判定。
测试原理
皮肤紧致度主要依赖于皮肤中的胶原蛋白和弹性蛋白。成纤维细胞是皮肤的主要细胞成分，分布在皮肤的真皮层内，能够产生大量的胶原蛋白与弹性纤维，对维持皮肤的结构稳定和皮肤弹性起到重要作用。成纤维细胞的活力与增殖率决定着皮肤的紧致度，进而影响到皮肤的状态。成纤维细胞的活力下降，数量减少，就会导致皮肤衰老。因此，通过测试样品对人源成纤维细胞增殖情况的影响，可以评价样品的紧致功效。
在体外测试中，细胞增殖情况可以通过MTT法来检测。MTT法是一种通用的细胞活性检测方法，通过测定细胞代谢活动来间接反映细胞的增殖情况。
试验步骤
1.细胞培养：首先在体外培养成纤维细胞，这些细胞是皮肤中主要的胶原蛋白和弹性蛋白的产生者。
2.细胞处理：将待测试的化妆品样品添加到细胞培养基中，与成纤维细胞共同培养一定时间。
3.弹性蛋白提取：通过特定的生物化学方法提取细胞中的弹性蛋白。
4.含量测定：利用酶联免疫吸附测定（ELISA）或类似的生物化学分析方法测定弹性蛋白的含量。
试验步骤
1.细胞接种：
选用生长良好的人源成纤维细胞，消化后用细胞培养液制备成约1~2 x 10^5个/mL的细胞悬液。
接种到96孔板中，每孔200 μL，边缘孔加入200 μL的无菌PBS。
放置于二氧化碳培养箱中培养24小时±2小时。
2.加样：
吸掉培养板中的培养液，开展加样操作。
设定空白对照组、溶剂对照组和受试样品组。
受试样品组加入一定浓度的受试样品培养液。
每孔加液量均为200 μL。
3.半换液：
孵育24小时和48小时后取出96孔板进行半换液操作。
空白对照组和溶剂对照组换含2%新生牛血清的DMEM培养液。
受试样品组换含有受试样品的培养液。
结果评价
1.数据收集：记录每次实验的弹性蛋白含量数据。
2.统计分析：对数据进行统计分析，比较不同化妆品样品对弹性蛋白含量的影响。
3.效果评估：根据弹性蛋白含量的变化，评估化妆品的紧致功效。一般来说，弹性蛋白含量增加表明化妆品具有较好的紧致效果。
4.结果解释：结合实验数据和统计分析结果，解释化妆品对皮肤紧致度的可能影响机制。
4.MTT法检测：
在孵育结束后，向各孔中加入MTT溶液，继续孵育一定时间。
加入二甲基亚砜（DMSO）溶解形成的甲瓒晶体。
5.吸光度测定：
使用酶标仪测定各孔的吸光度，记录数据。
结果判定
通常设定一个阈值或标准，来判断样品是否具有显著的紧致功效。例如，如果受试样品组的细胞增殖率比对照组高一定百分比（如20%），则可以认为该样品具有显著的紧致效果。
通过人源成纤维细胞增殖试验，可以科学、客观地评估化妆品的紧致功效。这种方法不仅有助于化妆品企业优化产品配方，也为消费者提供了更可靠的产品选择依据。希望这篇文章能帮助你更好地理解化妆品紧致功效的科学测试方法。如果你有任何疑问或需要进一步的信息，欢迎随时咨询。
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