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微核试验:检测染色体异常的遗传毒性试验方法
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  • 2024-12-19
  • 来源:中科检测

什么是微核试验

微核试验是一种用于检测染色体或有丝分裂器损伤的遗传毒性试验方法。其原理基于观察无着丝粒的染色体片段或因纺锤体受损而丢失的整个染色体,这些染色体片段在细胞分裂后期仍留在子细胞的胞质内,形成微核。微核试验通过检测这些微核来评估受试物是否具有致突变作用。


微核试验原理

微核试验的基本原理是利用致突变物作用于骨髓细胞,导致其染色体发生畸变。染色体在致突变物的作用下可能会发生断裂,这些断裂的碎片在细胞分裂间期留在子代细胞内,形成规则的一个或几个圆形或椭圆形结构的小块物质,称为微核。由于微核比普通细胞核小,故可以通过显微镜进行观察和计数。通过比较处理组和对照组的微核率,可以评估受试物是否具有致突变作用。


微核试验方法

微核试验最常用的方法是啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验。以下是该方法的详细步骤:

1. 受试物处理:

以受试物处理啮齿类动物,通常采用灌胃或注射等方式。

设置对照组,对照组动物不接受受试物处理。

2. 样本采集:

在一定时间后处死动物,采集骨髓样本。

将骨髓样本制成涂片,以便观察。

3. 制片、固定和染色:

将骨髓涂片进行固定,常用的固定剂有甲醇或卡诺氏固定液。

对涂片进行染色,常用的染色方法有吉姆萨染色或孚尔根染色。

4. 显微镜下观察:

在显微镜下观察PCE中的微核,记录微核的数量。

通常使用高倍镜进行观察,以确保计数的准确性。

5. 数据分析:

计算处理组和对照组的微核率,并进行统计学分析。

如果处理组的微核率与对照组相比有统计学意义的增加,并且存在剂量-反应关系,则可认为该受试物是哺乳动物体细胞的致突变物。


除了啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞微核试验外,还有其他类型的微核试验,如人外周淋巴细胞微核试验和蚕豆根尖微核试验。人外周淋巴细胞微核试验可用于接触环境致突变物的人群的监测和危险性评价,而蚕豆根尖微核试验则是一种植物微核试验,可用于评估受试物对植物细胞的遗传毒性。


微核试验因其敏感性和简便性,在药物遗传毒性评价、环境监测和生态风险评估等领域得到了广泛应用。然而,该方法也存在一定的局限性,如动物种类和受试物种类的选择可能对结果产生影响,因此在具体应用时需要结合其他方法进行综合分析。 


中科检测开展微核试验服务,检测报告具有CMA资质,可根据产品需求开展化学品,消毒产品,化妆品等产品的微核试验服务。