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体外抗菌性能评价方法有哪些
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  • 2024-10-25
  • 来源:中科检测

在抗菌材料的研究与开发中,体外抗菌性能的评价是至关重要的步骤。通过一系列科学、准确的方法,可以评估抗菌剂或抗菌材料的杀菌效果,为其在实际应用中的效果提供可靠依据。中科检测开展体外抗菌性能评价服务,以下介绍几种常用的体外抗菌性能评价方法。

1. 平板涂布法

平板涂布法是一种直观且常用的抗菌效果评价方法。具体步骤如下:

处理细菌:将待测抗菌剂对细菌进行杀菌处理。

稀释涂布:将处理后的细菌稀释到合适的倍数,然后均匀涂布在无菌的培养基平板上。

培养与计数:将平板在适宜的条件下培养一段时间后,对长出的菌落进行计数。

计算抗菌效果:通过计算细菌存活率或致死率来表征抗菌剂的抗菌效果。存活率或致死率可以根据处理组和对照组的菌落数进行计算。


2. 活死染色法

活死染色法利用特定的荧光染料对细菌的存活状态进行染色,以判断抗菌剂的杀菌效果。例如,PI(碘化丙啶)是一种可对DNA染色的细胞核染色剂,只能穿透凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜,释放红色荧光。SYTO-9则是一种绿色荧光核酸染料,能对所有活细菌的DNA进行染色。通过结合这两种染料,可以准确区分活菌和死菌:

处理细菌:用待测抗菌剂处理细菌。

染色:将处理后的细菌进行活死染色。

观察:在荧光显微镜下观察染色结果。活菌通常显示绿色荧光,而死菌则显示红色荧光。

计算抗菌效果:根据红色荧光和绿色荧光的比例,计算细菌的存活率或致死率。


3. 扫描电镜观察法

扫描电镜观察法通过拍摄细菌的形态变化来评估抗菌剂的杀菌效果。

处理细菌:用待测抗菌剂处理细菌。

固定与染色:将处理后的细菌进行固定和染色处理。

观察:使用扫描电子显微镜观察细菌的形态变化。

评价:通过观察细菌的形态变化(如褶皱、凹陷或破损)来评估抗菌剂的杀菌效果。


4. 生物膜抑制法

以生物膜形式存在的细菌对抗生素等杀菌剂具有很强的抗性。因此,评价抗菌剂对生物膜的抑制效果也是衡量其抗菌性能的重要指标。

建立生物膜:在适宜的培养条件下,使细菌在培养基表面形成生物膜。

处理生物膜:用待测抗菌剂处理生物膜。

染色与观察:使用结晶紫等染料对生物膜进行染色,观察剩余生物膜的面积或测量其OD值。

计算抑制效果:根据生物膜面积或OD值的减少程度来计算抗菌剂对生物膜的抑制效果。


应用实例

ZnO/C介导的k-卡拉胶伪巴氏杀菌膜:用于金柑保鲜。通过构建具有优异光热性能的锌掺杂碳纳米颗粒(ZnO/C),然后将其加入k-卡拉胶(KC)基质中,得到具有抗菌性能的ZnO/C-KC纳米复合薄膜。通过平板涂布法评价其对大肠杆菌和单核增生李斯特菌的抗菌效果。

氧空位介导的α-MoO3杀菌纳米催化剂:该催化剂在黑暗中对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌活性。通过活死染色法验证其抗菌性能。

银纳米团簇增强伤口敷料:将具有生物活性的姜黄素引入到溶菌酶保护的超小银纳米簇中,并通过多重相互作用力进一步与海藻酸钠(Sa)水凝胶整合。通过扫描电镜观察法评价其对细菌膜的破坏效果。


综上所述,体外抗菌性能的评价方法多种多样,包括平板涂布法、活死染色法、扫描电镜观察法和生物膜抑制法等。这些方法各具特点,适用于不同场景下的抗菌性能评价。体外抗菌性能评价需通过合理选择和应用这些方法,可以全面、准确地评估抗菌剂或抗菌材料的杀菌效果,为其在实际应用中的效果提供可靠依据。中科检测具有P2生物安全实验室,开展生物材料体外抗菌性能评价服务,检测报告具有CMA和CNAS资质,欢迎咨询了解更多。