皮肤变态反应试验 局部淋巴结法 LLNA 化妆品安全技术规范是当前化妆品、消毒剂及化学品安全评估中评价致敏潜质的标准路径之一。局部淋巴结法（LLNA）以小鼠耳部淋巴结细胞增殖反应定量评价受试物诱发迟发型超敏反应的潜质，相较传统豚鼠最大化试验（GPMT）动物用量更少、结果可量化，已成为我国《化妆品安全技术规范》（2015年版）收录的认可方法。本文围绕该方法的定位、适用对象、技术指标与企业合规应用展开说明。

一、标准定位与实施节点

皮肤变态反应（致敏）试验 局部淋巴结试验（LLNA）收录于《化妆品安全技术规范》（2015年版），该规范由国家药品监督管理局发布并归口管理，现行有效。规范将 LLNA 列为化妆品原料及产品致敏性评价的毒理学试验方法之一，与体外替代方法、传统动物试验共同构成致敏风险评估的技术体系。

LLNA 方法在我国属现行化妆品监管技术依据，企业在开展化妆品新原料注册备案、特殊化妆品注册及普通化妆品备案的安全评估时，可依据该规范选用 LLNA 作为致敏性证据来源。对于已纳入《已使用化妆品原料目录》且历史安全数据充分的原料，可结合暴露水平与现有证据豁免或部分采纳动物试验结论；新原料及风险较高原料则通常需提交 LLNA 或等效试验数据。

二、适用对象与范围

LLNA 主要适用于需要评价致敏潜质的固态、液态及可溶受试物，常见适用对象包括：

• 化妆品原料及化妆品成品配方组分，用于新原料注册备案与产品安全评估；

• 消毒剂及消毒产品有效成分，用于健康相关产品的致敏风险评价；

• 化学品及工业原料，用于化学品分类、标签与安全性资料（SDS）编制。

方法对受试物的溶解性与刺激性有一定限制：高度刺激性或腐蚀性物质可能因诱导非特异性的局部炎症增殖而干扰 SI 判定，此类情形需结合局部淋巴结增殖试验的衰减分析（LLNA:DA）或辅以其他致敏性评价策略综合判断。

三、核心要求与关键指标

LLNA 以刺激指数（Stimulation Index，SI）作为致敏性判定的核心量化指标。试验将不同剂量受试物局部涂抹于小鼠耳部皮肤，连续给药数日后取耳部引流淋巴结，测定细胞摄取³H-胸腺嘧啶核苷的量或淋巴结细胞数，以受试组与溶剂对照组的比值计算 SI。

当 SI 达到或超过 3 时，受试物判定为致敏阳性，应在安全评估中标识其致敏风险并限制使用条件或暴露水平；SI 低于 3 且剂量-反应关系不支持致敏结论的，可视为无显著致敏潜质。

四、检测方法与评价路径

LLNA 的完整评价路径包含受试物配制、剂量探索、正式试验、SI 计算与结果判定五个环节。首先在预试验中确定最大可耐受剂量（MTD）与溶解度上限，据此设定正式试验的 3 个剂量梯度。正式试验期间每日于小鼠双耳涂布受试物，第 5～6 日腹腔注射³H-胸腺嘧啶核苷，取淋巴结后通过液体闪烁计数测定放射性掺入量。

结果评价以 SI 为核心，并需结合剂量-反应关系。单个高剂量 SI ≥ 3 而低剂量未达阈值时，应审慎解读，避免将刺激性增殖误判为致敏。阳性对照 SI 需达到方法有效性要求，否则整批数据视为无效。最终结论应明确"致敏阳性 / 致敏阴性 / 结果不确定需补充试验"，并附原始数据与统计分析。

五、企业合规建议

化妆品注册人、备案人及化学品生产企业在开展致敏性评价时，应首先明确产品所处监管环节：新原料注册备案须提交完整毒理学资料，LLNA 可作为致敏模块的核心证据；普通化妆品备案则可在充分证据基础上依安全评估结论合理减少动物试验。建议企业在配方设计阶段即纳入原料致敏性筛查，优先选用已有安全使用史的低致敏原料，降低后期合规成本。

消毒剂与工业化学品企业可参照 LLNA 结论完善 SDS 中的健康危害分类与警示标识，对判定为致敏阳性的物质落实接触控制与人员防护要求。所有试验数据应保留完整的原始记录、质控文件与方法验证材料，以备监管核查与同行评审引用。

六、中科检测能力与服务引导

中科检测拥有毒理学检测资质与专业技术团队，可依据《化妆品安全技术规范》（2015年版）开展皮肤变态反应（致敏）试验 局部淋巴结法（LLNA），为化妆品、消毒剂及化学品客户提供从方案设计、样品检测、数据分析到安全评估报告编制的一站式服务。实验室具备 CMA、CNAS 认可资质，所出具的 LLNA 检测数据可作为产品注册备案与安全评估的合规依据。

中科检测同时支持化妆品新原料注册备案资料撰写、产品安全评估报告（含致敏模块）编制及相关毒理项目的联合评价，帮助企业在合规框架下高效完成上市前安全性证据链搭建。

相关服务

• 毒理检测

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常见问题（FAQ）

Q1：哪些产品需要做皮肤变态反应（致敏）试验？化妆品新原料、存在致敏风险的化妆品配方组分、消毒剂有效成分以及需进行健康危害分类的化学品，均应依据《化妆品安全技术规范》（2015年版）等要求开展 LLNA 或等效致敏性评价。

Q2：LLNA 的刺激指数 SI 达到多少判定为致敏阳性？按《化妆品安全技术规范》（2015年版）局部淋巴结法要求，刺激指数 SI ≥ 3 时判定受试物具有致敏性，结果需结合剂量-反应关系与阳性对照有效性综合确认。

Q3：LLNA 出具的数据能否用于化妆品上市备案？中科检测依据《化妆品安全技术规范》（2015年版）开展的 LLNA 试验，在 CMA/CNAS 资质框架下出具的检测数据，可作为化妆品新原料注册备案及产品安全评估的合规证据。

Q4：中科检测能提供哪些 LLNA 相关支持？中科检测可承接 LLNA 试验检测、化妆品安全评估报告中致敏模块编制、新原料备案资料撰写，以及致敏性与其他毒理项目的联合评价服务。

Q5：高度刺激性物质能否直接用 LLNA 评价致敏性？高度刺激性或腐蚀性物质可能因非特异性炎症增殖干扰 SI 判定，此类情形需结合 LLNA 衰减分析或辅以其他致敏性评价策略，由专业机构综合研判结论。