一、为什么要发展口腔黏膜体外替代

• 3R 原则：替代（Replacement）、减少（Reduction）、优化（Refinement）推动减少口腔黏膜刺激试验的动物用量，尤其牙膏、漱口水、口腔护理产品等需反复经口暴露的场景。

• 伦理与批次一致性：体外模型避免活体颊囊内操作，批次间差异小、终点可量化。

• 监管趋势：皮肤刺激（OECD 431/439）、皮肤致敏（OECD 442 系列）的体外路径已成熟互认；口腔黏膜作为特殊接触部位，其体外方法仍在研究与补充验证阶段，尚未形成广泛互认的正式替代路径。

二、主要体外方法与模型

口腔黏膜体外评价以重组三维上皮模型为核心，锚定黏膜屏障损伤的关键事件。

• EpiOral™ 模型：源自人口腔黏膜上皮细胞的 3D 重组模型，保留复层鳞状上皮结构，可用于模拟口腔黏膜屏障，评价受试物对口腔黏膜的刺激性。目前多用于研究、方法验证与筛查，正式监管互认程度低于皮肤模型。

• TEER（跨膜电阻）：经上皮/跨内皮电阻反映黏膜屏障完整性，受试物破坏紧密连接后 TEER 下降，是屏障损伤的直接量化终点。

• MTT / 细胞活力：通过 MTT 法测定模型组织存活率，存活率下降提示细胞毒性/刺激性，逻辑与皮肤模型（OECD 431/439）一致。

• LDH 释放 / 炎症因子：乳酸脱氢酶释放与 IL-1α、IL-8 等炎症介质可作为黏膜刺激与炎症反应的补充终点。

• 与皮肤模型差异：口腔黏膜模型在解剖部位、唾液环境、菌群与咀嚼摩擦等影响因素上与皮肤不同，不能简单套用皮肤刺激体外判据，需单独建立预测模型与接受标准。

三、OECD 492 的适用范围澄清

检索资料中常见一处引用错误，需明确校正：

• OECD 492 不是"仓鼠颊囊体外模型"。OECD 492（体外眼刺激：重组角膜上皮模型试验）使用的是 EpiOcular™ 等重组人角膜上皮模型，评价的是眼刺激性，与口腔黏膜、金黄地鼠颊囊均无对应关系。

• 将 OECD 492 解释为黏膜/颊囊体外模型，是对标准的误读，易误导选题与申报。口腔黏膜的体外研究应指向 EpiOral™ 等口腔黏膜特异性模型，而非 OECD 492。

• 其余眼刺激体外方法 OECD 437（BCOP）、OECD 491（ICE）同样针对眼，不应用于口腔黏膜替代场景。

四、国内对应与转化

• 现行国标/技术规范中，口腔黏膜刺激的正式评价仍以金黄地鼠颊囊法（见篇2）为主路径；体外模型多处于研究、方法验证与补充筛查阶段。

• 医疗器械生物学评价（GB/T 16886.10 / GB/T 16886.23）与口腔医疗器械专用标准（YY/T 0127.13）中，黏膜刺激体外数据可作为证据权重（weight of evidence）的一部分，支撑 IATA 整合判定，但是否可作为正式替代路径以法规与资质附表为准。

• 出口申报可参考 OECD 框架下的黏膜刺激体外研究，但需确认目标市场对口腔黏膜特异性模型的接受程度。

五、IATA 整合策略

• 以体外初筛（EpiOral™ + TEER/MTT）识别高/低刺激风险物质；

• 结合 QSAR、read-across 与已有同类口腔产品数据加权；

• 对风险不确定或处于边界区间的样本，仍可能需以金黄地鼠颊囊法做体内确认；

• 输出与现行法规一致的口腔黏膜刺激分级结论。

需注意：口腔黏膜体外模型成熟度低于皮肤，整合策略的可靠性高度依赖模型验证与数据库积累。

六、适用边界

本文仅作方法科普，不宣称任何机构的口腔黏膜体外替代检测能力。目前口腔黏膜刺激的合规主路径仍是体内金黄地鼠颊囊法（单次/多次、肉眼+病理），体外模型作为研究与补充筛查工具；具体承接项目及适用标准以资质附表为准。